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尿液中嗎啡檢測
TOXI-LAB酸解決之評估…[ 台南縣衛生局 ] 林燕萍•周玉鳳
TOXI-LAB方法是目前衛生單位常用於檢驗尿液中是否含有嗎啡(Morphine)的確認方法，因
以TOXI-LAB方法檢驗，尿液檢體並未經前處理，但以GC-MS方法檢驗，尿液檢體需以酸解
法做前處理。
因此，本實驗藉酸解法做尿液檢體之前處理，再進行TOXI-LAB方法(TOXI-LAB酸解法)，提
高TOXI-LAB 方法之敏感度。本實驗以 DRI(Diagnostic reagents, INC.USA.)方法為初步篩
檢法，結果呈陽性者再以TOXI-LAB方法確認，若TOXI-LAB方法結果呈陰性者，則進行TOXI-
LAB酸解法與GC-MS方法相互比較。
本實驗尿液檢體共570件，DRI方法檢驗結果290件陽性，這290件陽性檢體再以TOXI-LAB
方法確認，結果 245 件陽性，另外45件無法確認之尿液檢體，則進一步做 TOXI-LAB 酸解
法及GC-MS方法，檢驗結果TOXI-LAB酸解法陽性28件，陰性17件；GC-MS方法陽性39件
，陰性6件；其中GC-MS方法結果陰性6件，在TOXI-LAB方法及TOXI-LAB酸解法結果亦呈
陰性。因此，本實驗TOXI-LAB酸解法敏感度可由原來TOXI-LAB方法的87.9%提高到96.3%
；TOXI-LAB方法及TOXI-LAB酸解法之特異性皆為100%。
緒論(Introduction)
目前衛生單位鑑定尿液中是否有嗎啡反應，一般以：
螢光偏極化免疫分析法(Fluorescence polarization immunoassay , FPIA)或
酵素免疫分析法(Enzyme immunoassay, EIA)
為初步篩檢方法，檢驗結果陽性者再以TOXI-LAB方法確認。但是，TOXI-LAB方法之
敏感度較低，導致二種方法 結果前後不一，造成判讀上的困擾。
尿液中嗎啡是由於吸食海洛因(Heroin)代謝而來，其代謝過程為海洛因先代謝成O6
-Acetylmorphine (6-AM) ，再分為二種路徑代謝，一路徑大約有22%代謝成嗎啡，
另一路徑大約78%會與Glucuronide結合形成Mophine-O3-Glucuronide、Mophine-
O6-Glucuronide、O3-Glucuronide- O6-monoacetylmorphine，其中又以Mophine-
O3-Glucuronide為主要之結合物。
因TOXI-LAB方法主要是檢驗尿液中的自由型-嗎啡(free form- morphine)，所以只能
檢測到大約22%游離出來的嗎啡，造成檢驗的敏感度降低。目前可以利用酵素法、
酸解法等前處理方法來打斷Glucuronide與O6-Acetylmorphine (6-AM) 之 間鍵結，
使嗎啡游離出來，再以TOXI-LAB方法確認時，可提高本檢驗方法之敏感度。本實驗
利用酵素免疫分析法(EIA)－DRI方法為初步篩檢法，結果呈陽性者再以TOXI-LAB方
法確認，當 TOXI-LAB方法結果呈陽性，則判讀為嗎啡陽性；若 TOXI-LAB方法結果
呈陰性，則進行 TOXI-LAB酸解法及外送行政院衛生署管制藥品管理局做 GC-MS方
法。
GC-MS 方法是毒藥物檢驗之黃金標準方法，因此本實驗主要目的是利用 TOXI-LAB
酸解法與TOXI-LAB方法及GC-MS方法三種結果做相互比較，得知以TOXI-LAB酸解
法之敏感度比TOXI-LAB方法好，實驗結果其敏感度可由原來87.9%提高到96.3%。
及GC-MS方法三種結果做相互比較，得知以TOXI-LAB酸解法之敏感度比TOXI-LAB
方法好，實驗結果其敏感度可由原來87.9%提高到96.3%。
材料與方法(Materials＆Methods)
檢體來源
檢體來源警政單位送驗之尿液檢體共570件，採檢日期自九十年十一月至九十一年
二月。 TOXI-LAB 方法溶液配製：展呈液 290ml 乙酸乙酯 (Ethyl acetate )＋10ml
甲醇( Methanol)＋5ml 蒸餾水。呈色液 3ml硝酸銀 (TOXI-DIP B2)＋250ml蒸餾水
。
DRI(Diagnostic reagents,INC.USA.)方法為酵素免疫分析法(Enzyme immunoassay
, EIA)，利用標示有葡萄糖-6-磷酸去氫酵素(Glucose-6-phosphate dehydrogenase
, G-6-PD) 的藥物與抗體結合作用時，被尿液檢體中所含有的嗎啡所競爭掉，當尿
液檢體含有嗎啡量愈多時，和抗體結合的機會愈高，使得未與抗體結合的G-6-PD
標示藥物變多，酵素活性間接地將加入的 NAD轉變為NADH，最後藉由自動生化
分析儀(Hitachi 7020)測得尿液檢體中嗎啡之濃度。
TOXI-LAB方法(Ansys technologies, INC.USA.) 取尿液4ml至 TOXI-LAB 萃取管中
，混合均勻，放置離心機中，以轉速3000rpm離心10 分鐘，取上層液至放有空白
小圓片之濃縮杯中並蓋上網罩後，置於電加熱板上並同時打開吹風機濃縮至乾，
取出以濃縮完成的小圓片，植入6 孔標準層析片B中，並植入一對照的標準小圓片
，放入展呈液中展開 (每一片層析片需3ml展呈液加50ul濃氨水)，當層析至 9公分
處時取出，放於加熱板上 30至 60秒後，直接放入呈色液中浸泡 1-2秒，取出後放
於加熱板上1-2分鐘觀察，如果有嗎啡反應，將會出現灰黑色斑點，並同時比對標
準品之顏色及位置 。 TOXI-LAB 酸解法取尿液 6ml 至玻璃管中，加入0.5ml 12N
HCL，置於高壓滅菌鍋中121℃,20分鐘, 15 psi(1kg / cm2)，完成後冷卻至室溫，
再加入1ml 2M Tris buffer及 10N NaOH (約400~500ul) ，中和pH值至7~9後，放
置離心機中，以轉速 3000-3500rpm 離心5分鐘，取 4ml上清液再進行 TOXI-LAB
方法。 GC-MS方法 (Agilent) GC：6890系列，MS：5973N，Column：HP-5MS
；外送行政院衛生署管制藥品管理局
結果(Results)
本實驗的尿液檢體共570件，以DRI方法檢驗結果有290件陽性，這290件陽性檢體
再以 TOXI-LAB 方法確認，結果有 245 件陽性，另外 45 件無法確認，則進一步以
TOXI-LAB酸解法檢驗(圖1.1及圖1.2)和外送行政院衛生署管制藥品管理局以GC-MS
方法相互比較，TOXI-LAB酸解法結果陽性28件，陰性17件；GC-MS方法結果陽性
39件，陰性6件(表1)。由實驗結果得知，DRI方法敏感度為100%，特異性為97.9%
；TOXI-LAB方法敏感度為87.9%，特異性為100%；TOXI-LAB酸解法敏感度為96.3
%，特異性為100%(表2)。
左圖:圖1.1 1.2.3.4.5為DRI方法結果陽性者，進行TOXI-LAB方法確認，其結果皆為陰性；6為對照標準品。
右圖:圖1.2 1.2.3.4.5為DRI方法結果陽性者，進行TOXI-LAB方法結果為陰性者，再以TOXI-LAB酸解法確認，其結果皆為陽性；6為對照標準品。
表一：尿液檢驗結果
方法
檢體數量
陽性數
陰性數
DRI方法
570
290
280
TOXI-LAB方法
290＊1
245
46
TOXI-LAB酸解法
45＊2
28
17＊3
GC-MS方法
45
39
6
＊1 290件為DRI方法結果陽性者。
＊2 45件為TOXI-LAB方法結果陰性者。
＊3 17件包括GC-MS方法結果陰性6件，因此有11件TOXI-LAB酸解法未檢測出來。
表二：檢驗方法敏感度與特異性之比較
方法
敏感度（%）
特異性（%）
DRI方法
100
97.9
TOXI-LAB方法
87.9
100
TOXI-LAB酸解法
96.3
100
註：敏感度（%）＝【真陽性 /（真陽性+偽陰性）】×100
特異性（%）＝【真陰性 /（真陰性+偽陽性）】×100
討論（Discussion）
目前衛生單位皆以TOXI-LAB方法為確認尿液檢體中嗎啡反應之方法，但因其敏感
度問題，而導致判讀上之困難，必須外送行政院衛生署管制藥品管理局以GC-MS
方法做最終確認。本篇報告主要是以TOXI-LAB酸解法來做確認，利用強酸及溫度
來酸解尿液，使嗎啡游離出來，以增加尿液中自由型嗎啡，再進行TOXI-LAB方法
，使敏感度由原來87.9﹪提高到96.3﹪。其中有6件尿液檢體GC-MS方法結果呈陰
性，而該6件於TOXI-LAB方法及TOXI-LAB酸解法亦皆呈陰性反應，所以，TOXI-LAB
方法及TOXI-LAB酸解法之特異性為100﹪。
本實驗中使用之DRI方法，雖然它的敏感度及特異性都不差，但因其篩檢的藥物對
象是鴉片類（Opiate），包括嗎啡、可待因（Codeine）等，並非只專一於嗎啡的
篩檢，因此會產生偽陽性。在此方法中，有2件尿液檢體DRI方法結果呈陽性，
TOXI-LAB方法及TOXI-LAB酸解法皆呈陰性反應，GC-MS方法確認為嗎啡陰性、可
待因陽性，因此若尿液檢體只含有可待因，則DRI方法會產生偽陽性，TOXI-LAB方
法及TOXI-LAB酸解法是不會產生偽陽性，但卻無法確認可待因之反應。
另外有14件尿液檢體DRI方法結果呈陽性且數據頗高，但TOXI-LAB 方法結果呈陰
性，GC-MS方法確認為嗎啡及可待因皆呈陽性，可待因是否會干擾TOXI-LAB 方法
之檢驗，還有待研究。45件尿液檢體TOXI-LAB方法結果呈陰性中，有22件DRI方
法檢驗結果數據低於2000ng/ml，是否TOXI-LAB方法對於嗎啡含量低於2000ng/ml
之尿液檢體敏感度不好，仍不得而知。
本實驗得知，TOXI-LAB酸解法比TOXI-LAB方法之敏感度好，它對尿液中嗎啡之反
應，可以檢測出部分檢體是TOXI-LAB方法無法檢測出來的，將來或許可以提供給
衛生單位在嗎啡檢測，以TOXI-LAB方法無法確認時，可以先利用該方法確認，再
決定是否外送行政院衛生署管制藥品管理局，以爭時效。
中華民國實驗室認證體系 http://www.cnla.org.tw/
MSDSonline http://www.msdsonline.com/
衛生署藥物食品檢驗局 http://www.nlfd.gov.tw/
衛生署管制藥品管理局 http://www.nbcd.gov.tw/Default.asp
衛生署疾病管制局 http://www.cdc.gov.tw/ch/
中華民國醫事檢驗學會 http://www.labmed.org.tw/
3A醫學檢驗聯盟 http://www.3-a.com.tw/
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表一：尿液檢驗結果 
